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SuperCultureTM 小鼠淋巴細胞培養基

發布時間:2016.11.07

                                                         

     

 SuperCultureTM  小鼠淋巴細胞培養基(Serum-Free Medium for Lymphocyte)適用于小鼠淋巴細胞、DC 細胞的體外培養。本產品是一款化學成分限定的培養基,該培養基中的所有成分均使用細胞培養級別的原料生產,不含血清,有效避免血清質量變動及血清組分、外源成分對實驗研究的影響,可實現小鼠淋巴細胞、DC 細胞等免疫細胞的體外培養。


使用方法:

例1:小鼠T淋巴細胞培養

1、 培養器皿的預包被:取 5μg/ml 小鼠 CD3 單抗包被培養器皿,4℃過夜或 37℃孵育 2 小時。使用前移除剩余包被液。

2、 將 SuperCultureTM  小鼠淋巴細胞培養基放置室溫平衡。

3、 無菌分離小鼠外周血淋巴細胞或脾臟淋巴細胞(建議使用達優小鼠淋巴細胞分離

液:DKW33-R0100)。

4、 根據計數結果,用SuperCultureTM  小鼠淋巴細胞培養基將分離獲得的淋巴細胞按2-2.5×106 個/ml 的濃度接種于已包被小鼠 CD3 單抗的細胞培養器皿中,加入 5μg/ml 的小鼠 CD28 單抗、300U/ml 的 rmIL-2,刺激 T 淋巴細胞的生長和增殖,37℃,5% CO2、飽和濕度的培養箱中培養。

5、 觀察細胞活化狀態,每 2-3  天取樣計數細胞濃度并根據計數結果補充新鮮

SuperCultureTM  小鼠淋巴細胞培養基(含 300U/ml 的 rmIL-2),調整細胞濃度為 1.5×106個/ml。

6、 收獲細胞供后續檢測或實驗使用。

 

2:小鼠骨髓DC細胞培養

1、 將 SuperCultureTM  小鼠淋巴細胞培養基放置室溫平衡。

2、 無菌分離小鼠骨髓單核細胞。根據計數結果,用 SuperCultureTM  小鼠淋巴細胞

培養基將分離獲得的單核細胞按 1-5×106 個/ml 的濃度接種于 6 孔板或 12 孔板中,每孔加入終濃度 200U/ml 的 rmGM-CSF 和 rmIL-4,37℃,5% CO2、飽和濕度的培養箱培養。

3、 48 小時后,輕輕晃動培養板,吸棄全部培養基及懸浮細胞,加含 200U/ml 的 rmGM-CSF 和 rmIL-4 的新鮮培養基繼續培養。

4、 隔日半量換液,即收集舊培養液,離心后用含 200U/ml 的 rmGM-CSF 和 rmIL-4

的新鮮培養基重懸細胞沉淀,然后再將細胞懸液放回原皿。

5、 第 6 天半量換液后加細胞因子 TNF-α 1000U/ml 或其他促成熟的細胞因子,繼

續培養兩天,以促進樹突狀細胞成熟(可在 TNF-α 加入前 1 天加入抗原,以獲得抗原負載的 DC)。

6、 收集懸浮和輕微貼壁的細胞,即為成熟的 DC。


保存方法:

2~8℃,避光保存,保持無菌,保質期 12 個月。

注意:

 

本品避免反復凍融,使用時注意無菌操作。

本品培養T淋巴細胞時,加入2-5%的細胞培養添加物可增強細胞擴增效率。



貨號

       名稱

規格







SuperCultureTM 小鼠淋巴細胞培養基



DKW34-MCL1


250ml



Serum-Free Medium for Mouse Lymphocyte









本品僅供研究使用。


400-630-4366
 
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